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PCR实验室的主要特点:由于疫情的特殊情况,核酸检测任务大幅度增加,各地对移动PCR实验室需求猛增;有关移动PCR实验室的建设,必须严格按照一般PCR实验室的标准,但移动PCR实验室有其自身的特殊性。移动PCR实验室空间有限,又在户外使用。所以,在保证满足基本条件外,对空调及新风机组有特殊的要求,个别PCR移动实验室按照普通的PCR实验室建设,造成不良的工作环境,工作人员的舒适性受到了很大的影响。
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PCR实验室各区功能及主要设备:试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。
样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。
扩增区:主要进行DNA扩增项目。已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有加样器,、和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。
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PCR实验室通风系统及压力控制:各区域之间应具备单间的实验工艺流、气流、物流与人员流动,形成单向流程的保护屏障。避免实验室之间的相互干扰,也防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送风、排风的比例,以保证整个实验区的压力要求。
PCR实验室装饰:实验室围护结构应牢固,气密性好; 所有阴阳角宜采用圆弧过度;墙体内壁光洁,不积尘、易清洗、易消毒、耐腐蚀;地面使用环氧树脂自流坪或PVC卷材,材料应满足光洁、耐腐蚀、无缝隙、无渗漏的基本要求。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
PCR实验总是出现假阳性,明明没有加模板,结果却扩出了产物。如果这种现象频频出现,就要注意一下操作环境。这里涉及气溶胶的概念,气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,能在空气中滞留至少几个小时。
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