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PCR 实验室基本要求:
1、 PCR 实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域。只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,有上述前面三个区域即可。各区域应完全独立分隔,不应有任何的空气直通。
2、标准的PCR实验室产物分析区或三个区域的后一个区域(即扩增及产物分析区),空气流向应由室外向室内,可通过在室内设置通风橱、排风扇或其他排风系统达到空气流由室外向室内流动的要求。
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PCR实验室控制防止污染环境的方法:
实验操作标准化
1、临床医学基因扩增检验实验室的技术人员必须进行入岗学习,学习合格后方可从事临床医学基因扩增检验工作;
2、在整个实验过程中,操作者一定要戴好手套,定期更换手套。另外,在实际操作中应用一次性帽子也是合理避免环境污染的一种对策;
3、清理工作要及时,得当。实验结束后,一定要立即对现场进行清理,除了用基本的消菌液对实验室表面进行擦洗消菌或紫外线灯直接消菌外,还要对一些实验仪器进行高电压消菌。
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PCR实验室设计建设标准规范
各区域的功能与设备
试剂制备区主要为扩增试剂的准备,分装盒保存。主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、紫外灯。
样品制备区主要是样品的混样和测试样品的制备。其主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水槽、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。操作台是否使用生物安全柜、净化工作台,或工作台,要根据样品的性质和制备要求来决定,如疾控中心、临床医学实验室一般选择生物安全柜,植物、检疫等选择柜。
扩散区为pcr扩增反应系统的制备和模板的添加、核酸扩增。在生物安全柜(超净台)内进行加样,超净台气流方向宜选用垂直式。冰箱,生物安全柜,离心加样装置,废物容器,紫外灯等。
扩增产物分析区为扩增产物的分析区域。如果只使用全自动扩增检测仪,可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。本区域所使用的仪器设备有、、加样器和水浴箱等。
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PCR实验室设计建设标准规范:
实验室通风系统
在实验室通风系统设计和各区域气压控制中,应设置单向的实验工艺流、物流、与气流,形成单向过程的保护屏障,避免实验室间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染,产生假性结果。虽然PCR实验室对净化要求并不严格,但为避免各实验区交叉污染,宜采用全送排的气流组织形式。
实验室的装修
实验室的墙体,包括顶棚,应保证结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用弧形线条过滤;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀,易于清洗消毒;地面材料应符合无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀等要求。地板建议采用聚卷材地面或自流平地面,整体性好,清洗方便,耐腐蚀。
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