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色谱柱的活化步骤：

1. 在保持柱湿润的情况下，用（如或）洗涤柱子。例如，在开始使用柱子之前，要用3-5倍柱子体积的洗涤一下柱子。

2. 将纯水通过柱子流通20-30min。这一步可以去除残留的有机化合物和杂质。注意保持柱子湿润。

3. 通过柱子流通一定比例的与水混合物（例如：70%+30%水）。这样可以逐渐增加有机相的浓度，有助于保护柱子不被溶剂冲击。

4. 接着，可以使用一定比例的溶解样品，并以柱洗涤液的方式通过柱子。可以考虑用一些柱洗涤液去除样品残留。

5. 后，洗涤柱子以消除任何残留的溶液，或将柱子存放在一定的缓冲液/中，直到再次使用。

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液相色谱柱的五大填装方法

1.高压匀浆法装填

2.湿法装填

3.干法装填

4.等密度法装填

5.高粘度法装填

目前大多数实验室是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。液相色谱柱、特别是液相色谱柱的填装，需要有较高的技巧和熟练的技能。因此，有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。

但是只要掌握了一些基本的规律和方法，任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。

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①高压操作的安全问题。常发生的问题是柱子与匀浆罐连接不牢，造成加压时柱头被高压冲下或柱子从匀浆罐上滑脱。此时，轻则填装失败，材料损失，重则造成人身伤害事故，一定要加以防范。除每次填装前均须仔细确认是否连接正确且牢靠外，还可加上由法兰盘和长螺杆组成的预防脱落装置，以防万一。

②通常，先填装的柱床较后填装的柱床紧密。因此，当使用时宜以相反的方向为宜，即让近匀浆罐一端作为使用时流动相的出口，而填装时的出口端则作为流动相的入口。

③新柱子使用前应以甲i醇冲洗20-30min, 后，再改用流动相平衡。

④新柱子宜选适宜的标准样品进行评价并记录，以备存查和比较。

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